RESUMEN Y EXPLICACIÓN LA PRUEBA
La malaria es una enfermedad febril, hemolítica y transmitida por mosquitos que infecta a más de 200 millones de personas y mata a más de 1 millón de personas por año.Es causada por cuatro especies de Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale y P. malariae.Todos estos plasmodios infectan y destruyen los eritrocitos humanos, produciendo escalofríos, fiebre, anemia y esplenomegalia.P. falciparum causa una enfermedad más grave que las otras especies de plasmodios y representa la mayoría de las muertes por paludismo.P. falciparum y P. vivax son los patógenos más comunes, sin embargo, existe una variación geográfica considerable en la distribución de especies.
Tradicionalmente, el paludismo se diagnostica mediante la demostración de los organismos en frotis gruesos de sangre periférica teñidos con Giemsa, y las diferentes especies de plasmodium se distinguen por su aparición en los eritrocitos infectados.La técnica es capaz de realizar un diagnóstico preciso y confiable, pero solo cuando la realizan microscopistas expertos que utilizan protocolos definidos, lo que presenta obstáculos importantes para las áreas remotas y pobres del mundo.
La prueba rápida Malaria Pf/Pv Ag está desarrollada para resolver estos obstáculos.Utiliza anticuerpos específicos para la proteína II rica en histidina de P. falciparum (pHRP-II) y para la lactato deshidrogenasa de P. vivax (Pv-LDH) para detectar y diferenciar simultáneamente la infección por P. falciparum y P. vivax.La prueba puede ser realizada por personal no capacitado o mínimamente calificado, sin equipo de laboratorio.
PRINCIPIO
La prueba rápida Malaria Pf/Pv Ag es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral.Los componentes de la tira de prueba consisten en: 1) una almohadilla de conjugado de color burdeos que contiene anticuerpo anti-Pv-LDH de ratón conjugado con oro coloide (conjugados Pv-LDH-oro) y anticuerpo anti-pHRP-II de ratón conjugado con oro coloide (conjugados pHRP-II-oro), 2) una tira de membrana de nitrocelulosa que contiene dos bandas de prueba (bandas Pv y Pf) y una banda de control (banda C).La banda Pv está recubierta previamente con otro anticuerpo específico anti-Pv-LDH de ratón para la detección de la infección por Pv, la banda Pf está recubierta con anticuerpos policlonales anti-pHRP-II para la detección de la infección por Pf y la banda C está recubierta con IgG anti-ratón de cabra.
Durante el ensayo, se dispensa un volumen adecuado de muestra de sangre en el pozo de muestra (S) del casete de prueba, se agrega un tampón de lisis al pozo de tampón (B).El tampón contiene un detergente que lisa los glóbulos rojos y libera varios antígenos, que migran por acción capilar a través de la tira contenida en el casete.Pv-LDH, si está presente en la muestra, se unirá a los conjugados Pv-LDH-oro.Luego, el inmunocomplejo es capturado en la membrana por el anticuerpo anti-Pv-LDH precubierto, formando una banda de Pv de color burdeos, lo que indica un resultado positivo de la prueba de Pv.Alternativamente, pHRP-II, si está presente en la muestra, se unirá a los conjugados pHRP-II-oro.Luego, el inmunocomplejo es capturado en la membrana por los anticuerpos anti-pHRP-II recubiertos previamente, formando una banda de Pf de color burdeos, lo que indica un resultado positivo de la prueba de Pf.La ausencia de cualquier banda de prueba sugiere un resultado negativo.La prueba contiene un control interno (banda C) que debe exhibir una banda de color burdeos del inmunocomplejo de cabra anti-IgG de ratón / IgG de ratón (anti-Pv-LDH y anti-pHRPII)-oro conjugados independientemente del desarrollo de color en cualquiera de las bandas de prueba.De lo contrario, el resultado de la prueba no es válido y la muestra debe volver a analizarse con otro dispositivo.
