RESUMEN Y EXPLICACIÓN LA PRUEBA
La malaria es una enfermedad febril, hemolítica y transmitida por mosquitos que infecta a más de 200 millones de personas y mata a más de 1 millón de personas por año.Es causada por cuatro especies de Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale y P. malariae.Todos estos plasmodios infectan y destruyen los eritrocitos humanos, produciendo escalofríos, fiebre, anemia y esplenomegalia.P. falciparum causa una enfermedad más grave que las otras especies de plasmodios y representa la mayoría de las muertes por malaria, y es uno de los dos patógenos de malaria más comunes.
Tradicionalmente, el paludismo se diagnostica mediante la demostración de los organismos en frotis gruesos de sangre periférica teñidos con Giemsa, y las diferentes especies de plasmodium se distinguen por su aparición en los eritrocitos infectados.La técnica es capaz de realizar un diagnóstico preciso y confiable, pero solo cuando la realizan microscopistas expertos que utilizan protocolos definidos, lo que presenta obstáculos importantes para las áreas remotas y pobres del mundo.
La prueba rápida Pf Ag está desarrollada para resolver estos obstáculos.Detecta el antígeno específico de Pf pHRP-II en muestras de sangre humana.Puede ser realizado por personal no capacitado o mínimamente capacitado, sin equipo de laboratorio.
PRINCIPIO
La prueba rápida Pf Ag es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral.Los componentes de la tira reactiva consisten en: 1) una almohadilla de conjugado de color burdeos que contiene anticuerpo monoclonal anti-pHRP-II conjugado con oro coloidal (conjugados pHRP II-oro), 2) una tira de membrana de nitrocelulosa que contiene una banda de prueba (Pf) y una banda de control (banda C).La banda Pf está recubierta con anticuerpos policlonales anti-pHRP-II y la banda C está recubierta con IgG anti-ratón de cabra.
Durante el ensayo, se dispensa un volumen adecuado de muestra de sangre en el pozo de muestra (S) del casete de prueba, se agrega un tampón de lisis al pozo de tampón (B).El tampón contiene un detergente que lisa los glóbulos rojos y libera el antígeno pHRPII, que migra por acción capilar a través de la tira contenida en el casete.pHRP-II, si está presente en la muestra, se unirá a los conjugados pHRP II-oro.Luego, el inmunocomplejo es capturado en la membrana por los anticuerpos antipHRP II policlonales recubiertos previamente, formando una banda Pf de color burdeos, lo que indica un resultado positivo de la prueba Pf.
La ausencia de la banda Pf sugiere un resultado negativo.La prueba contiene un control interno (banda C) que debe exhibir una banda de color burdeos del inmunocomplejo de IgG anti-ratón de cabra / IgG de ratón (conjugados pHRP II-oro) independientemente del desarrollo de color en cualquiera de las bandas Pf.De lo contrario, el resultado de la prueba no es válido y la muestra debe volver a analizarse con otro dispositivo.
