RESUMEN Y EXPLICACIÓN LA PRUEBA
La filariasis linfática conocida como Elefantiasis, causada principalmente por W. bancrofti y B. malayi, afecta a unos 120 millones de personas en 80 países.La enfermedad se transmite a los humanos por la picadura de mosquitos infectados dentro de los cuales las microflarias succionadas de un sujeto humano infectado se desarrollan en larvas de tercera etapa.En general, se requiere una exposición repetida y prolongada a las larvas infectadas para que se establezca la infección humana.
El diagnóstico parasitológico definitivo es la demostración de microflarias en muestras de sangre.Sin embargo, esta prueba estándar de oro está restringida por el requisito de recolección de sangre nocturna y la falta de sensibilidad adecuada.La detección de antígenos circulantes está disponible comercialmente.Su utilidad es limitada para W. bancrofti.Además, la microfilaremia y la antigenemia se desarrollan de meses a años después de la exposición.
La detección de anticuerpos proporciona un medio temprano para detectar la infección por parásitos filariales.La presencia de IgM contra los antígenos del parásito sugiere una infección actual, mientras que la IgG corresponde a una etapa tardía de la infección o una infección pasada.Además, la identificación de antígenos conservados permite aplicar la prueba de 'pan-filaria'.La utilización de proteínas recombinantes elimina la reacción cruzada con personas que padecen otras enfermedades parasitarias.
La prueba rápida Combo IgG/IgM de filariasis utiliza recombinantes conservados
antígenos para detectar simultáneamente IgG e IgM contra los parásitos W. bancrofti y B. malayi sin la restricción de la recolección de muestras.
PRINCIPIO
El kit de prueba rápida de Filariasis IgG/IgM es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral.El casete de prueba consta de: 1) una almohadilla de conjugado de color burdeos que contiene antígenos comunes recombinantes de W. bancrofti y B. malayi conjugados con oro coloidal (conjugados de filariasis) y conjugados de IgG-oro de conejo, 2) una tira de membrana de nitrocelulosa que contiene dos bandas de prueba (bandas M y G) y una banda de control (banda C).La banda M está precubierta con IgM monoclonal antihumano para la detección de IgM anti-W. bancrofti y B. malayi, la banda G está precubierta con reactivos para la detección de IgG anti-W.bancrofti y B. malayi, y la banda C está recubierta previamente con IgG anti-conejo de cabra.
Cuando se dispensa un volumen adecuado de muestra de prueba en el pozo de muestra del casete, la muestra migra por acción capilar a través del casete.Los anticuerpos IgM contra W. bancrofti o B. malayi, si están presentes en la muestra, se unirán a los conjugados de Filariasis.Luego, el inmunocomplejo es capturado en la membrana por el anticuerpo IgM antihumano recubierto previamente, formando una banda M de color burdeos, lo que indica un resultado positivo de la prueba de IgM para W. bancrofti o B. malayi.
Los anticuerpos IgG contra W. bancrofti o B. malayi, si están presentes en la muestra, se unirán a los conjugados de Filariasis.El inmunocomplejo luego es capturado por los reactivos pre-revestidos en la membrana, formando una banda G de color burdeos, lo que indica un resultado positivo de la prueba W. bancrofti o B. malayi IgG.
La ausencia de bandas de prueba (M y G) sugiere un resultado negativo.La prueba contiene un control interno (banda C) que debe exhibir una banda de color burdeos del inmunocomplejo de cabra anti conejo IgG/conejo IgG-oro conjugado independientemente del desarrollo de color en cualquiera de las bandas de prueba.De lo contrario, el resultado de la prueba no es válido y la muestra debe volver a analizarse con otro dispositivo.